豬瘟病毒抗原快速檢測卡
實驗原理:豬瘟抗原?檢測試劑盒(膠體金法),系采用良好的膠體金免疫層析技術(shù)檢測樣本(全血、血清、血漿)中抗豬瘟抗原的方法。整個試驗只需20分鐘,操作簡便、快速、準確,靈敏度高、結(jié)果直觀、容易判定。本試劑盒內(nèi)還設計一張“金標試紙與正向間接血凝試驗實物參照圖”,用試紙檢測線的顏色與實物參照圖對照,便可粗略估計樣品中抗原的滴度。
【樣品處理】
1. 取一定量的去脂肪組織樣本,用剪刀剪碎;
2. 稱取 2g 剪碎樣本于 50 ml 離心管中,并加入 4ml 去離 子水, 0.5ml 1M 鹽酸 , 0.1ml 樣 本衍生化試劑 1,,0.1ml 衍生化試劑 2,充分混合 3min;
3. 60℃水浴條件下孵育 1h;
4. 取出后加入 5ml 0.1M 磷酸氫二鉀,0.4ml 1M 氫氧化 鈉,倒入一瓶提取劑,充分混合 1min ,4000 轉(zhuǎn)/分鐘,離心 5min;
5. 移取上層溶液 3ml 于 5ml 離心管中,60℃下空氣吹 干;
6. 向吹干的試管中加入 1ml 凈化劑,加蓋振蕩 1min,然 后加入 0.5ml 復溶液,充分混勻,4000 轉(zhuǎn)/分鐘,離心1min(或靜置至明顯分層);
7. 吸取 0.1 毫升下層溶液,待檢;
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【使用步驟】 在進行測試前先完整閱讀使用說明書,使用前將試劑板和待檢樣本溶液恢復至室溫(20℃~30℃)。
1.從原包裝袋中取出試劑板,水平放置于觀察者正面, 如上圖右側(cè)所示(打開后請立即使用);
2.吸取待檢樣品溶液 100 微升于金標微孔中,用小滴管 吹打*溶解孔內(nèi)紅色物質(zhì),等待反應 5 分鐘;
3.吸取孔內(nèi)所有溶液滴加到加樣孔(見上圖)中,加樣 后開始計時;
4. 結(jié)果應在 5~8 分鐘讀取,其他時間判讀無效。
【結(jié)果判斷】
1. 陰性(-): T 線顯色(檢測線,靠近加樣孔一端)比 C 線(對照線)深或一樣深,表示樣品中呋 喃它
酮代謝物濃度低于檢測限或不含呋喃它酮 代謝物。
2. 陽性(+): T 線顯色比 C 線淺,或 T 線無顯色,表示樣品中呋喃它酮代謝物殘留濃度高于檢測限,T 線顯色比 C 線越淺,表示樣品中呋喃它 酮代謝物殘留濃度越高。
3.無效:未出現(xiàn) C 線,可能是操作不當或試劑板已失 效。應再次閱讀說明書,并用新的試劑板重新 測試。代謝物濃度低于檢測限或不含呋喃它酮 代謝物。
4. 陽性(+): T 線顯色比 C 線淺,或 T 線無顯色,表示樣品中呋喃它酮代謝物殘留濃度高于檢測限,T 線顯色比 C 線越淺,表示樣品中呋喃它 酮代謝物殘留濃度越高。
5.無效:未出現(xiàn) C 線,可能是操作不當或試劑板已失 效。應再次閱讀說明書,并用新的試劑板重新測試。
組織檢測步驟:
1、將樣本魚蝦蟹、畜禽肉、內(nèi)臟等去皮去脂肪,用均質(zhì)器均質(zhì)樣本,稱取3±0.05g均質(zhì)物至15ml離心管中。
2、依次加入4ml蒸餾水、0.5ml試劑A和0.6ml衍生化試劑,振蕩混勻,在65℃水浴中孵育30min。
3、依次加入1ml試劑B、0.4ml試劑C和1瓶提取劑(4ml),振蕩混勻。
4、在室溫下(20-25℃)4000r/min離心5min,取2ml上層有機相至5ml離心管中,在50-60℃水浴中用氮氣(或公司提供的空氣吹干儀)吹干。
5、取1ml凈化劑溶解干燥物,再加入0.5ml試劑D振蕩混勻,在室溫下(20-25℃)4000r/min離心2min,待檢。
?如使用全血標本檢測,標本的移動速度可能較慢,必要時可在加樣約1分鐘后,在加樣孔內(nèi)滴加1滴PBS作輔助液,以促進標本移動。
公司優(yōu)勢:
1)質(zhì)量:我司提供的的試劑均經(jīng)過出廠檢測。不對可退換
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